第一节 酶的制备及活力测定
第一节 酶的制备及活力测定【课标要求】研究酶的存在和简单制作方法，尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。【知识梳理】背景知识 1、酶在活细胞内合成，在细胞内起催化作用，称为________。1、生物细胞产生的酶2、由细胞内产生然后分泌到细胞外发挥作用，称为________。 1、提取胞内酶，需要破碎________，可用破碎仪、研磨器或匀浆机 2、提取酶的方法 使酶从中释放出来，进入细胞外的溶液中，经过滤、离心制备成________。 2、提取胞外酶，可直接从________________________中提取。 在酶的提取过程中，________、________等多种环境条件都可能影响酶的空间结构导致酶变性直至丧失活力。因而，提取出的酶首先需要检测酶的________。 （1）定义：通常以单位时间内________或者单位时间内________ 3、酶的活力 （2）测定方法：________和________ 实践案例：植物淀粉酶的制备及活力测定材料器具：略活动程序：1、提取酶液 2、滴加酶液：取4支试管编号后均加入ph=5.6的________________缓冲溶液。 向1、2试管中各加入未煮过的________ 1ml 向3、4试管中各加入已煮过的________ 1ml3、恒温处理：为什么要进行恒温40°c处理？答：保证酶在________温度下充分发生反应。4、钝化处理：钝化处理的原因？答：使酶的活性________，从而使反应减慢或停止。5、测定吸光值：用分光光度计在波长________处进行比色。6、绘制标准曲线7、结果分析：（1）从标准曲线中查出________。 （2）计算淀粉酶的活力。探究活动：1、制备过氧化氢酶粗酶液以新鲜________、________________为材料经过粉碎、研磨、离心，取________即可得到过氧化氢酶粗酶液。2、用分光光度法测定过氧化氢酶的活力在过氧化氢酶存在时，过氧化氢将愈创木酚氧化生成________色产物，这种产物在波长470 nm处有最大吸收峰，通过测定________可以计算出过氧化氢酶的活力。3、用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶的活力如果在反应系统中加入________的过氧化氢溶液，经酶促反应后，在酸性条件下，用高锰酸钾溶液滴定________的h2o2，然后根据消耗的h2o2量计算出过氧化氢酶的活力。高锰酸钾滴定时：当出现________色并不再消退时标志着滴定达到终点。【复习指要】 1、学法指导：本节课应初步学会酶的制备及活力测定。学会使用滴定法的具体操作，并运用所学知识和方法去进行酶的活力的测定。本节课的酶的相关知识和酶的活力测定技术的知识应引起重视，在高考选择题和实验题中都有可能体现。2、疑难解析：在温度、ph影响酶活性的实验中，始终都贯穿着对照原则，而在设置对照实验时最重要的是运用单一变量原则，其中的变量就是我们所研究的对象，所以在分析实验问题时，要紧紧抓住研究变量，把其他可能影响实验结果的变量变为常量，才能保证对照实验结果的严密性和准确性。 对于温度对酶活性影响的关系曲线，在低于最适温度时，活性受温度影响比高于最适温度时的小。 【典题解析】1.在生物体内，各种化学反应之所以能有条不紊地进行，是因为（ ）a.酶的催化效率具有高效性 b.酶的种类具有多样性 c.酶的催化作用具有专一性 d.酶的空间结构具有稳定性[解析]生物体内同时进行很多化学反应，这些化学反应是互不干涉的，因为催化各种化学反应的酶不同，对一种酶来讲，只能催化一种或一类化学反应，即酶的专一性特点保证了各种化学反应互不干涉。[答案]c2.下列关于酶的叙述错误的是（ ）a.有些酶是核酸 b.酶的数量因与化学反应而减少 c.酶的活性与ph有关 d.酶的催化效率很高[解析]本题考查了酶的性质，酶是活细胞产生的一类具有催化作用的有机物，绝大多数的酶是蛋白质少数酶是rna。酶既具有无机催化剂的特点，又有本身的特点，高效性和专一性，并且需要适宜的条件。[答案]b【聚焦高考】1. （xx年全国高考题）将小麦种子分别置于200c和300c培养箱中培养4天，依次取等量的萌发种子分别制成提取液i和提取液ⅱ。取3支试管甲、乙、丙，分别加入等量的淀粉液，然后按下图加入等量的提取液和蒸馏水，450c水浴保温5分钟，立即在3支试管中加人等量斐林试剂并煮沸2分钟，摇匀观察试管中的颜色。结果是（ d ）a、甲呈蓝色，乙呈砖红色，丙呈无色 b、甲呈无色，乙呈砖红色，丙呈蓝色c、甲、乙皆呈蓝色，丙呈砖红色 d、甲呈浅砖红色，乙呈砖红色，丙呈蓝色2. (上海高考题)右图为某酶在不同温度下反应曲线和时间的关系，从图中不能获得的信息是（ d ）a、酶反应的最适温度b、酶因热而失活 生 成 物 时间70℃60℃20℃50℃30℃40℃c、酶反应生成物量与时间的关系d、酶反应速度和酶量的关系